囊腫性纖維化

分類代碼： 0405

疾病類別： 04

疾病名稱：囊狀纖維化 ( Cystic Fibrosis )

現階段政府公告之罕見疾病：有

是否已發行該疾病之宣導單張：有

ICD-9-CM診斷代碼：277.00
ICD-10-CM診斷代碼：E84.9

囊狀纖維化症是一種體染色體隱性遺傳疾病，由於患者的第七對染色體長臂上的CFTR基因缺陷所造成。此病的發生率與種族有關，其中以白人的發生率最高；約為1/3,200個活產兒，亞洲及非洲人最少見，小於1/15,000。

目錄 Show

Clinical and gene mutation features of cystic fibrosis: an analysis of 8 cases
Conclusions
1. 资料与方法
1.1. 研究对象
1.2. 方法
1.3. 统计学分析
2.1. 一般资料及临床特征
2.2. 基因检测结果
参考文献

由於CFTR的缺陷，使得患者外分泌腺的上皮細胞無法正常傳送氯離子，產生異常黏液（分泌物變黏且乾），阻塞在身體多個器官的分泌管道，而影響呼吸系統、消化系統及生殖系統的功能。

此病症狀多變且難以診斷，約15~20％的病患在剛出生時會因腸阻塞而解不出胎便。此外，病患汗液濃縮的程度是一般人的5倍，所以患童皮膚的味道會很鹹。隨著年齡的增加，受到感染的風險增加，其他症狀亦會開始陸續出現；在肺部方面，異常的黏液會阻塞呼吸道而妨礙呼吸，且可能會有哮喘的情形。患者亦容易感染肺部疾病，例如：支氣管炎、肺炎。而肺部疾病即為造成此症病患死亡的主因。再者，約有65％的病患會因胰管的阻塞而妨礙消化酵素分泌到腸道，使得無法正常吸收養分，或併發慢性腹瀉，以致發育不良。且由於胰臟功能的異常，也可能因此而誘發糖尿病。此外，約有5％的病患會因膽管的阻塞而妨礙消化，患童也常因此胃口不好、體重下降，同時損傷肝功能。生殖系統部份，可能造成輸送管道（例如輸精管、輸卵管）的發育異常或阻塞而導致不孕。

由於症狀多樣較難辨識，須經由相關的檢查以進一步確診，包括：
一、攝影檢查：病患可經由頭部特殊X光攝影，發現鼻竇及鼻腔有不透明或鼻中隔彎曲的情形。此外，肺部X光或斷層掃瞄可檢查肺部感染的程度。

二、實驗室檢查：可進行汗液的氯化物濃度分析，患者的數值為60mEq/L以上（正常值為30 mEq/L），帶因者可能介於30∼60 mEq/L之間。

三、基因檢查：可經由基因的突變點分析，找出基因缺陷的位置，目前有超過1000種基因突變被報導過，其中最常見的是p.Phe508del變異，約佔30~80%左右的患者(依不同種族而有變化，北歐族群約為66%)。

在治療方面，目前主要治療方式著重在解除感染時的症狀，並配合拍痰及姿勢引流等以利濃痰排出，必要時則須抽痰或以外科手術治療肺塌陷、氣胸等併發症。新近研發的化痰藥劑可大為減低痰液的黏稠度，有助於肺部症狀的控制；正壓呼吸器的使用，有時可以加上震盪式呼吸器氣流的給予，對改善患者的呼吸狀況也很有幫忙。另外，接受預防注射減少病毒或細菌感染的機會，也是一個維護患者健康的重要對策。2017年委託台大醫院基因醫學部審稿

以上資料轉錄自本會「認識罕見遺傳疾病系列」網頁，其他有關此項疾病之介紹，請詳見「罕見遺傳疾病一點通」網頁

Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2022 Jul 15; 24(7): 771–777.

Language: Chinese | English

Clinical and gene mutation features of cystic fibrosis: an analysis of 8 cases

Guest Editor (s): 邓芳明

Abstract

目的

总结分析囊性纤维化（cystic fibrosis，CF）患儿的临床及基因突变位点，以提高对CF的认识，减少误诊、漏诊。

方法

回顾性分析河北省儿童医院2018~2021年确诊的8例CF患儿的病历资料。

结果

8例患儿（男5例，女3例），诊断年龄为3~48个月（中位年龄8个月），发病年龄为0~24个月（中位年龄2.5个月）。临床表现为反复呼吸道感染7例，鼻窦炎3例，支气管扩张4例，腹泻8例，脂肪泻3例，可疑胰腺功能不全6例，胰腺CF 1例，营养不良5例，假性Bartter综合征4例。最常见的呼吸道病原为铜绿假单胞菌（4例）。经高通量测序、多重连接探针扩增技术和Sanger测序验证共发现16个变异位点，包括移码突变5个，无义突变4个，错义突变4个，外显子缺失2个，剪接突变1个。8例患儿均检出CFTR基因突变。最常见的基因突变类型是p.G970D（3例），观察到1例F508del基因突变。检出4个新发现的变异：deletion exon15、c.3796_3797dupGA(p.I1267Kfs*12)、c.2328dupA(p.V777Sfs*2)、c.2950G>A(p.D984N)。

结论

p.G970D为CF患儿最常见的突变类型。对于临床上反复呼吸道感染，合并或不合并消化系统表现和假性Bartter综合征，以及呼吸道病原学检测示铜绿假单胞菌阳性的患儿，需警惕CF。

Keywords: 囊性纤维化, 基因突变, 反复呼吸道感染, 胰腺功能不全, 儿童

Abstract

Objective

To study the clinical features and gene mutation sites of children with cystic fibrosis (CF), in order to improve the understanding of CF to reduce misdiagnosis and missed diagnosis.

Methods

A retrospective analysis was performed on the medical records of 8 children with CF who were diagnosed in Hebei Children's Hospital from 2018 to 2021.

Results

Among the 8 children with CF, there were 5 boys and 3 girls, with an age of 3-48 months (median 8 months) at diagnosis, and the age of onset ranged from 0 to 24 months (median 2.5 months). Clinical manifestations included recurrent respiratory infection in 7 children, sinusitis in 3 children, bronchiectasis in 4 children, diarrhea in 8 children, fatty diarrhea in 3 children, suspected pancreatic insufficiency in 6 children, pancreatic cystic fibrosis in 1 child, malnutrition in 5 children, and pseudo-Bartter syndrome in 4 children. The most common respiratory pathogens were Pseudomonas aeruginosa (4 children). A total of 16 mutation sites were identified by high-throughput sequencing, multiplex ligation-dependent probe amplification, and Sanger sequencing, including 5 frameshift mutations, 4 nonsense mutations, 4 missense mutations, 2 exon deletions, and 1 splice mutation. CFTR mutations were found in all 8 children. p.G970D was the most common mutation (3 children), and F508del mutation was observed in one child. Four novel mutations were noted: deletion exon15, c.3796_3797dupGA(p.I1267Kfs*12), c.2328dupA(p.V777Sfs*2), and c.2950G>A(p.D984N).

Conclusions

p.G970D is the most common mutation type in children with CF. CF should be considered for children who have recurrent respiratory infection or test positive for Pseudomonas aeruginosa, with or without digestive manifestations or pseudo-Bartter syndrome.

Keywords: Cystic fibrosis, Gene mutation, Recurrent respiratory infection, Pancreatic insufficiency, Child

囊性纤维化（cystic fibrosis，CF）是一种常染色体隐性遗传的慢性致死性疾病，发病机制为囊性纤维化跨膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）突变导致CFTR通道蛋白的离子和水转运障碍，累及呼吸道、消化、生殖多个系统，临床表现为反复呼吸道感染、胰腺功能不全、男性双侧输精管缺失等‎［1］。CF发病率存在种族、地域差异性，多见于白种人。美国发病率约1∶4 000‎［2］，英国约1∶2 500‎［3］，日本约1∶350 000‎［4］，我国少见，暂无该病的流行病学资料。近几年随着医学技术进步，我国CF患者被更多地确诊，但存在诊断延迟现象。本文总结分析8例CF患儿的临床及遗传学特征，让更多临床医生了解并重视该病，减少误诊漏诊。

1. 资料与方法

1.1. 研究对象

以河北省儿童医院2018~2021年确诊的8例CF患儿为研究对象，进行回顾性病例总结分析。

CF的诊断标准‎［5］：（1）一项或多项典型CF临床特征；（2）CF家族史；（3）新生儿CF筛查试验阳性；（4）汗液氯离子浓度≥60 mmol/L；（5）CFTR 2个致病变异（父母双方等位基因各提供1个）；（6）CFTR功能障碍（鼻电位差和/或肠道电流测量）。满足其中（1）~（3）中至少１条，加上（4）~（6）中至少１条即可诊断为CF。

胰腺CF的诊断标准［6］：符合CF的患儿具有胰腺受损的临床表现，主要为胰腺外分泌功能不全（pancreatic insufficiency，PI）［7］导致的脂肪、蛋白质和糖类的吸收障碍，可表现为腹泻、体重下降，严重时可引起脂肪泻、营养不良及生长发育迟缓等症状。影像学检查可见胰腺受损征象，如胰腺饱满、胰腺实质回声不均、胰腺脂肪化、胰腺纤维化、胰腺扩张、胰腺萎缩、胰腺囊肿样变等。

1.2. 方法

病例资料收集：通过医院电子病历系统，收集患儿的确诊年龄、起病年龄、性别、既往史、个人史、家族史、体格检查、各项检查结果、治疗及随访情况等。

CFTR基因变异分析：（1）突变筛查：高通量测序（二代测序，next-generation sequencing，NGS）检测变异，多重连接探针扩增技术（multiple ligation probe amplification，MLPA）检测基因缺失与重复及拷贝数变异。（2）基因数据分析：变异分级依据美国医学遗传学与基因组学学会（American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG）制定的2015测序变异的解读指南进行致病性等级分类，查询CFTR2数据库（https://www.cftr2.org/）、CFTR-France数据库（https://cftr.iurc.montp.inserm.fr/cgi-bin/home.cgi#）行致病性分析。蛋白功能预测采用REVEL、SIFT、PolyPhen-2、MutationTaster、GERP+软件。（3）Sanger测序、qPCR测序进行验证。以上均由北京迈基诺基因科技有限公司、智因东方北京全谱医学检验实验室执行。

1.3. 统计学分析

采用描述性分析。计量资料采用范围（中位数）表示，计数资料采用例数表示。

2. 结果

2.1. 一般资料及临床特征

8例CF患儿中，男5例，女3例，无CF家族史，父母非近亲结婚，无白种人通婚史。诊断年龄为3~48个月（中位年龄8个月），发病年龄为0~24个月（中位年龄2.5个月）。8例患儿的临床特征见表1。临床表现为反复呼吸道感染7例，鼻窦炎3例，支气管扩张4例，腹泻8例，脂肪泻3例，可疑PI 6例，胰腺CF 1例，营养不良5例，假性Batter综合征（Pseudo-Bartter syndrome，PBS）4例。2例（例3、例6）行汗液电导率检测，显示汗液电导率增高。患儿最常见的呼吸道感染病原为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA；4例）。7例行胸部CT检查，其中4例存在支气管扩张，见图1。5例行支气管镜检查及治疗，均可见栓状、条索状分泌物，见图2。

表1

8例CF患儿临床表现、辅助检查及诊断依据

病例	性别	发病/诊断年龄 (月)	临床表现	病原学	影像学检查	支气管镜	CFTR变异	诊断依据*
1	女	4/7	反复呼吸道感染、呼吸衰竭、营养不良、腹泻、可疑PI、肝功能异常、PBS	鲍曼不动杆菌、皮特不动杆菌、近平滑念珠菌	胸部CT：双肺上叶透光不均	未做	2个致病变异	(1)+(5)
2	男	<1/8	反复呼吸道感染、营养不良、腹泻、可疑PI、PBS	SA	胸部CT：双肺炎症，右侧肋胸膜增厚	未做	2个致病变异	(1)+(5)
3	男	6/21	反复呼吸道感染、支气管扩张、直肠脱垂、腹泻、脂肪泻、可疑PI、肝功能异常、PBS、汗液电导率增高#	PA	胸部CT：双肺炎症伴小囊腔，左肺上叶支气管起始部狭窄。双侧胸膜局部增厚，支气管壁增厚、支气管扩张，所见层面肝脏密度不均匀减低	支气管内膜炎症（双侧），大量条索状、栓状分泌物	2个疑似致病变异	(1)+(4)+(5)
4	男	<1/18	反复呼吸道感染、支气管扩张、鼻窦炎、营养不良、腹泻、胰腺CF、PBS	PA	胸部CT：双肺炎症，右肺下叶支气管壁增厚、扩张腹部超声：肝脾稍大，实质回声增多，胰腺实质回声增粗增强欠均匀鼻窦CT：双侧筛窦、上颌窦、蝶窦炎症，腺样体稍大	支气管内膜炎症（双侧），大量黄白色栓状分泌物	2个致病变异	(1)+(5)
5	女	3/4	反复呼吸道感染、鼻窦炎、营养不良、腹泻、可疑PI、胆囊结石、肝功能异常	耐甲氧西林SA	胸部CT：双肺炎症，右肺上叶节段性肺不张腹部超声：肝实质回声增多增强，胆囊壁毛糙增厚、胆囊内沉积物鼻窦CT：左侧上颌窦炎症，右侧上颌窦、双侧筛窦部分黏膜稍增厚	支气管内膜炎症（双侧），大量白色条索状分泌物	2个致病变异	(1)+(5)
6	男	2/3	反复肺部感染、呼吸衰竭、支气管扩张、脂肪泻、腹泻、可疑PI、肝功能异常、汗液电导率增高#	耐碳青霉烯类PA	胸部CT：双侧支气管肺炎；右肺上叶支气管起始部、右肺中间支气管管腔细，支气管壁增厚、支气管扩张，肝实质密度低腹部超声：肝脾大，实质回声稍增粗，欠均匀腹部CT：肝脏密度明显减低	支气管内膜炎症（双侧），右上、左上叶支气管狭窄，大量黄绿色黏稠脓性条索状分泌物	2个致病变异	(1)+(4)+(5)
7	男	24/48	反复肺部感染、呼吸衰竭、支气管扩张、鼻窦炎、营养不良、腹泻、脂肪泻、可疑PI	耐碳青霉烯类PA、嗜芽孢窄食单胞菌、脱氮假单胞菌、流感嗜血杆菌、鲍曼不动杆菌	胸部CT：双肺炎症，部分支气管扩张并黏液栓形成；肝脏饱满，密度减低腹部超声：肝大，实质回声增多鼻窦CT：双侧筛窦、上颌窦、左侧蝶窦炎症	双侧支气管内膜炎症，支气管扩张，可见大量条索状及栓状分泌物	2个致病变异	(1)+(5)
8	女	<2/3	胆汁淤积性肝病、黄疸、腹泻、肝功能异常	未做	腹部超声：胆囊未充盈，肝实质回声增多增强，肝外胆管内径细	未做	2个疑似致病变异	(1)+(5)

4例患儿胸部CT表现 A：例3，双肺炎症伴小囊腔，左肺上叶支气管起始部狭窄。双侧胸膜局部增厚，可见支气管壁增厚、支气管扩张（箭头所示）。B：例4，双肺炎症，右肺下叶支气管壁增厚、扩张（箭头所示）。C：例6，双侧支气管肺炎，小气道病变不除外；右肺上叶支气管起始部、右肺中间支气管管腔细，可见支气管壁增厚、支气管扩张（箭头所示）。D：例7，双侧支气管扩张（箭头所示）伴双肺炎症。

5例患儿支气管镜下表现 A、B、C、D、E分别为例3、例4、例5、例6、例7，均可见栓状、条索状分泌物（箭头所示）。

例1、例2、例3、例4入院时行电解质及血气分析，发现存在电解质紊乱及代谢性碱中毒，见表2。

表2

4例CF患儿血电解质及血气分析结果

病例	电解质 (mmol/L)	动脉血气分析	合并症
钠	钾	氯	pH	PCO2 (mm Hg)	PO2 (mm Hg)	HCO3 - (mmol/L)
1	122.4	2.78	51.0	7.623	54.6	44.9	57.0	腹泻、中度脱水
2	124.7	2.04	54.6	7.538	36.2	57.4	31.0	呕吐、腹泻
3	117.9	2.39	60.5	7.630	44.4	75.0	47.6	中度脱水
4	124.6	2.12	71.2	7.696	31.0	95.8	37.1	腹泻

2.2. 基因检测结果

8例患儿均行基因检测，均检出CFTR基因突变。例2为纯合突变，其余7例为复合杂合突变。共发现16个变异位点（其中4个为新发现变异），包括移码突变5个，无义突变4个，错义突变4个，外显子缺失2个，剪接突变1个。最常见的基因突变类型是p.G970D（3例），观察到1例F508del基因突变。8例CF患儿的基因突变位点及致病性分析见表3。

表3

8例CF患儿基因突变位点及致病性分析

病例

外显子

核苷酸

氨基酸

纯合/杂合

ACMG致病性分析

CFTR-France

致病性分析

CFTR2致病性分析

变异类型

变异来源

Exon2-3

Exon18

c.54-5940_273+10250del

c.2909G>A

CFTRdele2,3

p.G970D

杂合

致病性变异

无

VUS5

无

致CF变异

外显子缺失

移码

父亲

母亲

Exon18

c.2909G>A

p.G970D

纯合

致病性变异

VUS5

致CF变异

错义

父母

Exon15

deletion exon15#

c.3796_3797dupGA#

p.I1267Kfs*12

杂合

疑似致病性变异

无

外显子缺失

移码

父亲

母亲

Exon22

Exon18

Exon22

c.3484C>T

c.2909G>A

c.3717+45G>A

p.R1162X

p.G970D

杂合

致病性变异

临床意义未明

致CF变异

VUS5

VUS1

致CF变异

无

无义

错义

剪接

母亲

父亲

母亲

Exon9

Exon14

c.1159_1160del1160delTT

c.2328dupA#

p.L387Nfs*23

p.V777Sfs*2

杂合

致病性变异

无

移码

父亲

母亲

Exon5

Exon15

c.577G>T

c.2547C>A

p.E193X

p.Y849X

杂合

致病性变异

致CF变异

无义

父亲

母亲

Exon14

Exon11

c.2374C>T

c.1521_1523delCTT

p.R792X

p.F508del

杂合

致病性变异

疑似致病性变异

致CF变异

无义

移码

父亲

母亲

Exon14

Exon11

c.2950G>A#

c.374T>C

p.D984N

p.I125T

杂合

疑似致病性变异

无

错义

父亲

母亲

3. 讨论

CF是一种多见于白种人的常染色体隐性遗传疾病，预后差、病死率高。1989年Riordan等‎［9］首次发现CF的致病基因位于7q31，致病机制是CFTR基因隐性突变致CFTR通道蛋白活性减低或丧失引起疾病。CFTR是一种cAMP依赖调控的氯离子通道蛋白，是三磷酸腺苷结合盒转运体家族的一员。CFTR蛋白广泛存在于气道、胃肠道、生殖道等多种器官的上皮组织顶膜，调节离子和水的转运。CFTR通道蛋白的离子和水转运障碍，黏液增加，管腔堵塞，引起多系统功能障碍。

CF患者通常以反复呼吸道感染为首发表现［10］，常表现为鼻窦炎、鼻息肉、反复肺部感染、支气管扩张、气胸、喘息、咯血、呼吸衰竭、杵状指等。CFTR功能障碍，气道上皮细胞Cl- 分泌减少而上皮细胞钠离子通道吸收Na+ 增加，造成细胞内高渗，从而使得气管表面液体减少，气道内黏液增加，纤毛摆动受限、清除能力下降，细菌定植引起反复炎症，肺结构破坏，肺功能进行性下降，最终患者呼吸衰竭造死亡［11］。本研究中7例CF患儿临床表现为反复肺部感染，其中伴有鼻窦炎3例，支气管扩张4例，呼吸衰竭3例，例7反复肺部感染，出院3个月后因呼吸衰竭死亡。7例患儿均存在肺部影像学异常表现，其中4例存在支气管扩张。胸部CT是检测CF患儿肺部情况的重要检查。有研究表明，影像学比肺功能更能敏感地反映肺部严重程度，CF典型胸部CT表现包括支气管扩张、黏液堵塞、空气滞留、灌注异常和肺气肿‎［12］。临床医师需定期监测患者肺部情况，了解疾病进展，对于反复呼吸道感染患儿应警惕CF。

本研究中6例患儿诊断为可疑PI，因存在CF基础疾病，有腹泻、脂肪泻、营养不良及生长发育迟缓等症状，粪便常规可见大量脂肪球，影像学检查可见胰腺回声改变，口服胰酶症状可缓解，但我院不能进行胰腺功能检测，故最终不能确诊。CFTR功能障碍时，黏稠液体阻塞胰腺管道，导致炎症、脂肪变、纤维化，随着年龄增长胰腺功能失代偿，PI比例逐渐升高。国外报道约90% CF患者合并PI［13］，我国学者报道14.1% CF患者出现PI［14］。我国CF患者合并PI比例明显低于国外，可能与我国CF患者基因突变类型多为轻型有关，故临床表现轻；也可能与胰腺功能检测困难，大部分医院不能完成该检测至最终确诊病例少有关。随着诊断技术的推广与提高，PI确诊率可能有所上升。

国外报道CF相关性肝病（cystic fibrosis-related liver disease，CFLD）为CF患者继呼吸衰竭、肺移植并发症的第三大死亡原因，约10%患者进展为肝硬化，2%~3%进展为门脉高压［15］，目前国内相关报道数量少。CF患者因黏稠且具有肝毒性胆汁阻塞胆道，早期可仅表现为肝脏氨基转移酶升高，但随病情进展可能会出现胆汁淤积性肝硬化、门静脉高压、晚期肝病。本研究中例1、例3、例5、例6、例8存在肝功能异常，影像学示肝脾、胆囊改变，但国外研究显示肝功能异常、黄疸、胆汁淤积、胆囊结石并不是CFLD危险因素，男性、小年龄、PI、严重CFTR突变等是CFLD的危险因素［16-17］，但是该5例患儿仍需警惕CFLD，临床医师对存在高危因素的患儿应提高警惕以早期识别CFLD。

例1、例2、例3、例4婴儿期均有PBS且为首发或主要表现。PBS发病机制为CFTR介导的Cl- 和上皮细胞钠离子通道介导的Na+ 吸收减少，大量Na+ 和Cl- 经汗液丢失，引起机体肾素-血管紧张素-醛固酮系统激活，造成电解质紊乱。国内外报道PBS可为CF的首发表现，出现在疾病早期，且容易复发［18-19］。这提醒临床医师，具有PBS表现的儿童需警惕CF，注意监测患儿电解质情况，尤其是天气炎热季节。

本研究8例患儿中有4例为PA定植感染，其中2例为耐碳青霉烯类PA。PA属于机会致病菌，具有分泌毒素、形成生物膜、群体感应等特点［20］。2019年美国CF基因会数据显示CF肺部病原菌43%为PA，25%为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌，14%为非结核分枝杆菌，12%为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌［2］。美国CF基金会指南强烈建议首次感染PA患者应行早期根除治疗［21］。我国目前针对PA感染主要是依据药敏试验选择敏感抗生素抗感染治疗，根除PA治疗临床少见。

目前已有2 000多种CFTR基因突变类型［10］。国外研究报道，该基因最常见的突变类型是cDNA的508位点苯丙氨酸缺失（p.F508del），90%的CF患者中发现至少有1个F508del等位基因，属于第Ⅱ类突变，CFTR蛋白功能严重丧失，多伴有PI［10，22］。目前我国仅报道3例携带F508del突变患者［23-25］。Tian等［25］报道我国CF突变类型多为少见突变，最常见的突变类型为p.G970D。本研究最常见的突变类型亦为p.G970D，共检出3例，F508del突变1例，与ACMG/美国妇产科医师协会（American College of Obstetricians and Gynecologists，ACOG）［26］提议的23个突变筛查模板不同，与国外报道［27］的CF最常见的5种突变c.1521_1523delCTT、c.1624G>T、c.1652G>A、c.350G>A、c.3909C>G不同，提示我国与国外CF基因突变谱不同。本研究发现2个基因大重排，例1患儿行全基因组测序发现CFTRdel2,3突变，例3患儿全外显子基因检测只检测到1个基因突变位点，进一步行MLPA检测发现deletion exon15突变。2018年美国CF基因会病人登记信息示约3%患者检测出<2个致病性变异［28］。这提醒临床医师疑诊CF患者若只检测出1个基因突变位点，可进一步行全基因组测序及MLPA检测。本研究发现deletion exon15、c.3796_3797dupGA(p.I1267Kfs*12)、c.2328dupA(p.V777Sfs*2)、c.2950G>A(p.D984N)在人类基因突变数据库中未收录，为新发现的变异，这扩大了我国CF的基因突变谱。

汗液氯离子水平升高是CF患者主要临床表现及诊断条件之一。我国研究报道，汗液电导率检测可用来代替汗液氯离子水平检测进行CF诊断，当汗液电导率超过80 mmol/L，考虑CF诊断［8］。本研究中2例患儿在北京儿童医院行汗液电导率检测，汗液电导率分别为110 mmol/L、140 mmol/L，均高于80 mmol/L，支持CF诊断。

本研究中8例患儿诊断中位年龄为8个月，中位发病年龄为2.5个月，提示CF患者存在诊断延迟现象，考虑以下原因：（1）我国CF患儿临床表现不典型，以肺部疾病为主要表现，合并PI比例低，诊断困难；（2）我国CF诊断试验不完善，尚未开展新生儿CF筛查、鼻腔电位差、肠道电流测量，开展汗液氯离子/电导率检测的医疗机构少，基因检测因价格昂贵致应用受限；（3）在我国CF属于罕见病，临床医师对该疾病认识不足，造成误诊漏诊。

综上，我国CF存在诊断延迟现象。我国CF患儿临床表现不典型，最常见的临床表现为反复呼吸道感染，合并PI比例明显低于国外。临床上如果发现患儿存在反复呼吸道感染（支气管扩张、鼻窦炎等），合并或不合并消化系统表现和PBS，呼吸道病原学检测示PA阳性，需警惕CF。p.G970D为CF患儿最常见的突变类型，F508del少见，与国外CF基因突变谱不同。本研究为CF未来精准治疗、制定我国基因突变谱、研究基因突变谱与临床表型关系、产前诊断提供了参考依据。

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